水解产物氨基酸分析aTRAQ™试剂盒

仅限研究使用,不可用于诊断过程。

用于水解产物氨基酸分析的 aTRAQ™ 试剂盒可让您测定蛋白质水解产物样品中 20 种氨基酸的含量,速度是传统氨基酸分析仪的四倍。本试剂盒旨在与 LC-MS/MS 系统配合使用。

  • 分析不会受到因色谱柱老化所致色谱漂移的影响
  • 试剂和衍生样品均较为稳定
  • 每一种氨基酸的内标均可提供可信的鉴定结果以及出色的准确度和精度
  • 通量高,每份样品的分析时间为 18 分钟
  • 样品量要求低至1 µg
  • 在3200QTRAP系统上使用,LLOQ 和 ULOQ 为 1 nmole, 动态范围超过4个数量级
  • 完整的试剂盒包括所需试剂、缓冲液、标准品、对照品和色谱柱
  • 添加自定义胺、氨基酸和小肽并生成相应内标的扩展功能
  • 执行自动移液步骤的可选功能

状态: 供应中状态

 

概述

性能更快,准确度更高。

aTRAQ 试剂提供一致的质量标签,有助于某一分子量区域内的氨基酸样品和内标实现 MS/MS 碎裂,并减少干扰。针对每个要进行分析的氨基酸使用内标,从而提高定量分析的精度和准确度;通过比较各氨基酸标准品和样品的保留时间以及分子量,可进行进一步确认。

aTRAQ 试剂衍生作用的机制如下所示(图 1)。各 aTRAQ 试剂标签都由报告基团和活性基团(与各氨基酸的伯胺基和仲胺基结合)组成。样品所用报告标签的分子量为 121 amu。内标所用报告标签的分子量为 113 amu。


图 1:一般标记反应。

水解产物标记反应在碱性 pH 值下缓冲。样品使用 aTRAQ 试剂 Δ8 标记,使反应时间达 30 分钟,冻干,然后与使用 aTRAQ 试剂 Δ0 预标记的内标混合。除了同位素位点数量不同以外,这两种 aTRAQ 试剂的结构完全相同。之后,注射混合物,使用液质联用(LC-MS/MS)(三重四级杆质谱仪或QTRAP 系统)在多反应监测 (MRM) 模式下进行分析。C18 色谱柱在柱温50°C 的进行高效液相色谱法分离。梯度、冲洗和平衡共计需要 18 分钟(见图 2)。使用 scheduled MRM 算法可最大程度地提高驻留时间,同时采集大量 MRM™离子对,从而实现更佳数据质量和重现性。

 


图 2:典型色谱图。

使用这种方法,每种氨基酸都有不同的标签,尽管由于保留时间一样而不能通过高效液相色谱(HPLC)区分。在 MS/MS 模式下,标签碎片产生报告离子,这些离子经过同位素编码,可产生不同的质量。MRM离子对由标记氨基酸质量和报告离子质量组成,用于区分样品和内标中的同一种氨基酸;使用这些峰面积比计算样品中氨基酸的浓度(见图 3)。

 


图 3:基本方案。

保修:一年期标准部件和人工修理保证(自仪器调试完成之日起)。

套件

 

部件号

套件名称/说明

4442675

aTRAQ 水解产物50份 试验起始试剂盒
包括除以下物品外的所有耗材:流动相(水和甲醇);按照氨基酸分析水解产物样品操作规程,运行 50 份aTRAQ 试剂标记样品所需的色谱柱 (4374841)。
还包括以下项:

aTRAQ 水解产物50 份试验试剂盒 (4442677)
包含足以标记 50 份水解产物样品的材料与 aTRAQ 试剂、附带分析证书的 aTRAQ 内标 (4442688) 以及快速参考卡。

aTRAQ 未标记标准品 (4442687)
用于测试 aTRAQ 试剂盒的未标记氨基酸混合物和操作规程。足以进行 10 次测试。

4374841

氨基酸分析仪 C18 色谱柱
反相(5 µm,4.6mm x 150mm)色谱柱

4442677

aTRAQ 水解产物 50 试验试剂盒
包含足以标记 50 份水解产物样品的材料与 aTRAQ 试剂、aTRAQ 内标 (4442688)、分析证书以及快速参考卡。

4442678

aTRAQ 水解产物 200 试验试剂盒
包含足以标记 200 份水解产物样品的材料与 aTRAQ 试剂、aTRAQ 内标 (4442688)、分析证书以及快速参考卡。

4442679

aTRAQ 水解产物标准品
包括以下标准品:

aTRAQ 内标 (4442688)
使用 aTRAQ 试剂 Δ0 标记的氨基酸标准品。将其添加至 aTRAQ 试剂 Δ8 标记的各采样样品中,作为内标使用。包括列出标准品(足够用于 50 份样品)中各氨基酸浓度的分析证书。

aTRAQ 未标记标准品 (4442687)
用于测试 aTRAQ 试剂盒的未标记氨基酸混合物和操作规程。足以进行 10 次测试。