

仅限研究使用,不可用于诊断过程。
用于水解产物氨基酸分析的 aTRAQ™ 试剂盒可让您测定蛋白质水解产物样品中 20 种氨基酸的含量,速度是传统氨基酸分析仪的四倍。本试剂盒旨在与 LC-MS/MS 系统配合使用。
aTRAQ 试剂提供一致的质量标签,有助于某一分子量区域内的氨基酸样品和内标实现 MS/MS 碎裂,并减少干扰。针对每个要进行分析的氨基酸使用内标,从而提高定量分析的精度和准确度;通过比较各氨基酸标准品和样品的保留时间以及分子量,可进行进一步确认。
aTRAQ 试剂衍生作用的机制如下所示(图 1)。各 aTRAQ 试剂标签都由报告基团和活性基团(与各氨基酸的伯胺基和仲胺基结合)组成。样品所用报告标签的分子量为 121 amu。内标所用报告标签的分子量为 113 amu。
水解产物标记反应在碱性 pH 值下缓冲。样品使用 aTRAQ 试剂 Δ8 标记,使反应时间达 30 分钟,冻干,然后与使用 aTRAQ 试剂 Δ0 预标记的内标混合。除了同位素位点数量不同以外,这两种 aTRAQ 试剂的结构完全相同。之后,注射混合物,使用液质联用(LC-MS/MS)(三重四级杆质谱仪或QTRAP 系统)在多反应监测 (MRM) 模式下进行分析。C18 色谱柱在柱温50°C 的进行高效液相色谱法分离。梯度、冲洗和平衡共计需要 18 分钟(见图 2)。使用 scheduled MRM 算法可最大程度地提高驻留时间,同时采集大量 MRM™离子对,从而实现更佳数据质量和重现性。
使用这种方法,每种氨基酸都有不同的标签,尽管由于保留时间一样而不能通过高效液相色谱(HPLC)区分。在 MS/MS 模式下,标签碎片产生报告离子,这些离子经过同位素编码,可产生不同的质量。MRM离子对由标记氨基酸质量和报告离子质量组成,用于区分样品和内标中的同一种氨基酸;使用这些峰面积比计算样品中氨基酸的浓度(见图 3)。
保修:一年期标准部件和人工修理保证(自仪器调试完成之日起)。
套件 |
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部件号 |
套件名称/说明 |
4442675 |
aTRAQ 水解产物50份 试验起始试剂盒 aTRAQ 水解产物50 份试验试剂盒 (4442677) aTRAQ 未标记标准品 (4442687) |
4374841 |
氨基酸分析仪 C18 色谱柱 |
4442677 |
aTRAQ 水解产物 50 试验试剂盒 |
4442678 |
aTRAQ 水解产物 200 试验试剂盒 |
4442679 |
aTRAQ 水解产物标准品 aTRAQ 内标 (4442688) aTRAQ 未标记标准品 (4442687) |